2 × PCR Master Mix (bo'yoqsiz)
PCR Master Mix - bu Taq DNK polimeraza, dNTP MgCl2 aralashmasi va optimallashtirilgan buferni o'z ichiga olgan foydalanishga tayyor an'anaviy PCR oldindan aralashtirilgan eritma.Reaksiya davomida kuchaytirish uchun faqat primer va shablon qo'shilishi mumkin, bu tajribaning ishlash bosqichlarini sezilarli darajada osonlashtiradi.Ushbu mahsulot ajoyib stabilizatorlarni o'z ichiga oladi va 4 ℃ haroratda 3 oy davomida saqlanishi mumkin.PCR mahsuloti 3′-dA protrusionga ega va uni T vektoriga osongina klonlash mumkin.
Saqlash shartlari
Mahsulot ikki yil davomida -25 ℃ ~ -15 ℃ haroratda saqlanishi kerak.
Texnik xususiyatlari
| Sadoqat (Taqga qarshi) | 1× |
| Issiq boshlanish | No |
| Osilgan | 3′-A |
| Polimeraza | Taq DNK polimeraza |
| Reaktsiya formati | SuperMix yoki Master Mix |
| Reaktsiya tezligi | Standart |
| Mahsulot turi | PCR Master Mix (2×) |
Ko'rsatmalar
1.Reaktsiya tizimi
| Komponentlar | Hajmi (mL) |
| Shablon DNK | Mos |
| Primer 1 (10 mkmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 mkmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50 gacha |
2.Amplifikatsiya protokoli
| Velosiped bosqichlari | Harorat (°C) | Vaqt | Velosipedlar |
| Oldindan denaturatsiya | 94 ℃ | 5 daqiqa | 1 |
| Denaturatsiya | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Yuvish | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Kengaytma | 72 ℃ | 30-60 sek/kb | |
| Yakuniy kengaytma | 72 ℃ | 10 daqiqa | 1 |
Eslatmalar:
1) Shablondan foydalanish: 50-200 ng genomik DNK;0,1-10 ng plazmid DNK.
2) Mg2+konsentratsiya: Ushbu mahsulotda ko'pgina PCR reaktsiyalari uchun mos bo'lgan 3 mM MgCl2 mavjud.
3) Yuvish harorati: Iltimos, Primerlarning nazariy Tm qiymatiga qarang.Yuvish harorati primerning nazariy qiymatidan 2-5 ℃ pastroqqa o'rnatilishi mumkin.
4) Uzatilish vaqti: Molekulyar identifikatsiya uchun 30 sek/kb tavsiya etiladi.Genlarni klonlash uchun, 60sek/kb tavsiya etiladi.
Eslatmalar
1.Xavfsizligingiz va sog'ligingiz uchun, iltimos, operatsiya uchun laboratoriya xalati va bir martalik qo'lqop kiying.
2.Faqat tadqiqot uchun foydalanish uchun!
