Hotstart Taq DNK polimeraza (5u/ul)
Taq DNK polimeraza - bu qo'sh antikorlar tomonidan ikki marta blokirovka qiluvchi issiq boshlang'ich DNK polimeraza. Bu mahsulot nafaqat Taq DNK polimerazasining 5'→3' polimeraza faolligini bloklaydi, balki 5'→3'eksonukleaza faolligini ham bloklaydi.Denaturatsiyadan oldingi haroratda 30 soniya davomida isitish antikorni to'liq inaktivatsiya qilishi va DNK polimeraza faolligi va ekzonukleaza faolligini chiqarishi mumkin.Ikki marta blokirovkalash xususiyati nafaqat mos kelmasligi yoki primer dimeridan kelib chiqadigan o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirishni samarali ravishda oldini oladi, balki probning buzilishi natijasida kelib chiqadigan floresans signalining pasayishini samarali ravishda inhibe qiladi, bu esa in vitro aniqlash reagentini tashish yoki xonada foydalanish paytida yanada barqaror qiladi. harorat.
Komponentlar
| Komponent | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
| Taq DNK polimeraza(5 U/mkl) | 50 mkl | 200 mkl | 2 ml | 5 ml |
Saqlash holati
Mahsulot quruq muz bilan jo'natiladi va -25 ° C ~ -15 ° C haroratda 2 yil davomida saqlanishi mumkin.
Texnik xususiyatlari
| Polimeraza | Taq DNK polimeraza |
| Tozalik | ≥ 95% (SDS-PAGE) |
| Issiq boshlanish | O'rnatilgan Hot Start |
| Reaktsiya tezligi | Standart |
| Eksonukleaza faoliyati | 5′→3′ |
Ko'rsatmalar
Reaktsiyani sozlash
| Komponentlar | Ovoz (mL) | Yakuniy konsentratsiya |
| 2 × bufera | 25 | 1× |
| Primer/prob aralashmasib | × | 0,1 mkmol/L-0,5 mkmol/L |
| Hotstart Taq polimeraza (5U/mkl) | 1.2 | 0,12 U/mkl |
| DNK shablonc | × | 0,1-100 ng |
| ddH2O | 50 gacha | - |
Eslatmalar:
1) Maxsus eksperimental dasturga ko'ra, tegishli reaksiya tamponini tayyorlash kerak.
2) DNK miqdori va problar yoki primerlar konsentratsiyasi tavsiya etilgan konsentratsiyalardir.Optimal konsentratsiyani maxsus tajriba sharoitlariga qarab sozlash mumkin.
Termal aylanish protokoli
| Qadam | Harorat(°C) | Vaqt | Velosipedlar |
| Oldindan denaturatsiya | 95 ℃ | 5 daqiqa | 1 |
| Denaturatsiya | 95 ℃ | 15 sek | 45 |
| Yuvish / kengaytirish | 60 ℃a | 30 sekb |
Eslatmalar:
1) Reaksiya harorati loyihalashtirilgan primerlarning Tm qiymatiga qarab o'rnatiladi.
2) Turli qPCR asboblari turli xil floresan signalni olish vaqtini talab qiladi, iltimos, eng qisqa vaqt chegarasiga ko'ra o'rnating.
Eslatmalar
Iltimos, sog'ligingiz va xavfsizligingizni ta'minlash uchun kerakli shaxsiy himoya vositalarini, masalan, laboratoriya xalati va qo'lqoplarni kiying!
