Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Tavsif
Mushuk raqami: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix shablon sifatida RNKga asoslangan multipleks miqdoriy PCR to'plamidir.Tajribada teskari transkripsiya va miqdoriy PCR bir xil reaksiya trubkasida amalga oshiriladi, bu eksperimental operatsiyani soddalashtiradi va ifloslanish xavfini kamaytiradi.Bufer va ferment aralashmasining noyob dizayni bir bosqichli liyofilizatsiyalangan tizimda ishlatilishi mumkin.To'plam miqdoriy kuchaytirish uchun hotstart Taq DNK polimeraza yordamida birinchi zanjirli cDNKni samarali sintez qilish uchun issiqlikka chidamli teskari transkriptazadan foydalanadi.U optimallashtirilgan reaksiya buferini, fermentlar aralashmasini va boshqalarni o'z ichiga oladi va o'ziga xos bo'lmagan PCR kuchaytirilishini samarali ravishda inhibe qiluvchi va bir nechta qPCR reaktsiyalarining kuchaytirish samaradorligini oshiradigan omillar qo'shildi, bu esa primerlarning kuchaytirish samaradorligini ta'minlagan holda bir nechta floresan miqdoriy kuchaytirilishini ta'minlaydi.
Komponentlar
| Ism |
| 1. Lyo-bufer |
| 2. Lyo-ferment aralashmasi |
| 3. Lyo himoyachisi |
Transport holatiion
Javob: Lyo-bufer va himoya: -25 ~ -15 ℃, saqlash muddati 1 yil.
B: Lyo-ferment aralashmasi, 2-8 ℃, saqlash muddati 6 oy.
Operatsion uchun ko'rsatma
1. Reaktsiya tizimi (misol sifatida 25 mkl oling)
| Komponentlar | Hajmi (mL) | Yakuniy konsentratsiya |
| Lyo-bufer | 6 | 1* |
| Lyo-ferment aralashmasi | 1 | - |
| Lyo-himoya qiluvchi | 8 | - |
| Primer aralashmasi (10 mkM) | 1 | 0,1-1uM |
| Prob aralashmasi (10 mkM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| RNK shabloni | 5 | - |
| DEPC H2O | 25 gacha | - |
2. Optimallashtirilgan velosport protokoli
1) Standart velosiped protokoli
| Reaktsiya bosqichi | Harorat | Vaqt | Velosiped | |
| 1 | Teskari transkripsiya | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Dastlabki denaturatsiya | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifikatsiya reaktsiyasi | 95°C | 15 soniya | 45 tsikl |
| 60°Cb | 30 soniyac |
2) Fast Cycling Protocol
|
| Reaktsiya bosqichi | Harorat | Vaqt | Velosiped |
| 1 | Teskari transkripsiya | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Dastlabki denaturatsiya | 95°C | 2 soniya | 1 |
| 3 | Amplifikatsiya reaktsiyasi | 95°C | 1sek |
45 tsikl |
| 60°Cb | 13 soniyac |
Eslatma:
a) Teskari transkripsiya: Harorat 10-15 daqiqa davomida 42°C yoki 50°C ni tanlashi mumkin.
b) Amplifikatsiya reaktsiyasi: Harorat loyihalashtirilgan primerlarning Tm qiymatiga qarab o'rnatiladi.
c)Floresans signal sotib olish: Iltimos, tajriba tartibini talablarga muvofiq o'rnatingasboblar qo'llanmasi.
Texnik ma'lumotlar/spetsifikatsiyalar
| Issiq boshlanish | O'rnatilgan issiq ishga tushirish |
| Aniqlash usuli | Primer-zondni aniqlash |
| PCR usuli | Bir bosqichli RT-qPCR |
| Namuna turi | RNK |
Eslatmalar
1. Ushbu mahsulot faqat tadqiqot uchun mo'ljallangan.
2. Sog'ligingiz va xavfsizligingizni ta'minlash uchun kerakli shaxsiy himoya vositalarini, masalan, laboratoriya xalati va qo'lqoplarni kiying！
