Peroksidaza (Horseradish manbai) Sinonimi: Vodorod peroksid oksidoreduktaza;HRP
Tavsif
Horseradish peroksidaza (HRP) horseradish (Amoracia rusticana) ildizlaridan ajratilgan va peroksidazalarning ferroprotoporfirin guruhiga kiradi.HRP vodorod peroksid (H2O2) bilan osongina birlashadi.Olingan [HRP-H2O2] kompleksi turli xil vodorod donorlarini oksidlashi mumkin:
Donor + H2O2 → Oksidlangan donor + 2 H2O
HRP turli substratlarni oksidlaydi (1-jadvalga qarang):
• Xromogen
• Xemiluminesans (masalan, luminol yoki izoluminol)
• Ftorogen (masalan, tiramin, homovanilik kislota yoki 4-gidroksifenil sirka kislotasi)
HRP - bu to'rtta disulfid ko'prigini o'z ichiga olgan bitta zanjirli polipeptid.HRP 18% uglevodni o'z ichiga olgan glikoproteindir.Uglevod tarkibi o'ziga xos izozimga qarab galaktoza, arabinoza, ksiloza, fukoza, mannoz, mannozamin va galaktozamindan iborat.
HRP ko'plab immunokimyoviy dasturlarda immunoglobulinlar uchun keng qo'llaniladigan yorliqdir, jumladan immunoblotting, immunohistokimyo va Elishay.HRP antikorlarga bir necha xil usullar bilan, shu jumladan glutaraldegid, periodat oksidlanishi, disulfid aloqalari orqali, shuningdek, aminokislotalar va tiolga yo'naltirilgan o'zaro bog'lovchilar orqali konjugatsiyalanishi mumkin.HRP antikorlar uchun eng kerakli belgidir, chunki u uchta eng mashhur ferment belgilaridan (peroksidaza, b-galaktozidaza, gidroksidi fosfataza) eng kichiki va eng barqaroridir va uning glikozillanishi o'ziga xos bo'lmagan bog'lanishning pasayishiga olib keladi.Glutaraldegid va periodat konjugatsiya usullarini ko'rib chiqish nashr etildi.
Peroksidaza eritmadagi glyukoza4 va peroksidlarni aniqlash uchun ham qo'llaniladi.Bir nechta nashrlar, 6-24 tezislar, 25-29 va 30-46 dissertatsiyalar o'zlarining tadqiqot protokollarida P8375 dan foydalanishni keltirdilar.
Kimyoviy tuzilishi
Spetsifikatsiya
Sinov elementlari | Texnik xususiyatlari |
Tavsif | Qizil-jigarrang amorf kukun, liyofillangan |
Faoliyat | ≥100U/mg |
Soflik (SDS-PAGE) | ≥90% |
Eruvchanlik (10 mg kukun / ml) | Toza |
Tarkibida bo'lgan fermentlar | |
NADH/NADPH oksidaza | ≤0,1% |
Katalaza | ≤0,005% |
ATPaz | ≤0,03% |
Tashish va saqlash
Transport:2-8 ° C ostida jo'natiladi
Saqlash:-20°C (uzoq muddatli), 2-8°C (qisqa muddatli) da saqlang
Tavsiya etilgan qayta sinovHayot:2 yil