Fosfataza ishqorli (ALP)
Tavsif
Ishqoriy fosfataza TAB5 genini tashuvchi rekombinant E. coli shtammidan olingan.Ferment DNK va RNK fosfomonoesterlarining 5´ va 3´ uchlarining fosforillanishini katalizlaydi.Shuningdek, u ribozani, shuningdek deoksiribonukleozid trifosfatlarni (NTP va dNTP) gidrolizlaydi.TAB5 ishqoriy fosfataza 5' chiqadigan, 5' chuqurlashtirilgan va to'mtoq uchlarida ishlaydi.Fosfataza ko'plab molekulyar biologiya dasturlarida, masalan, DNK yoki RNKning fosforlangan uchlarini olib tashlash uchun klonlash yoki zond uchlarini belgilashda ishlatilishi mumkin.Klonlash tajribalarida fosforillanish chiziqli plazmid DNKni o'z-o'zini bog'lashdan saqlaydi.Shuningdek, u DNK ketma-ketligi uchun shablonni tayyorlash uchun PCR reaktsiyalarida birlashtirilmagan dNTPlarni buzishi mumkin.5 daqiqa davomida 70 ° C haroratda qizdirilganda ferment to'liq va qaytarib bo'lmaydigan tarzda inaktivlanadi va shu bilan bog'lash yoki tugatishdan oldin fosfatazani olib tashlashni talab qilmaydi.
Foydalanish
1.Oqsillar (antikorlar, streptavidin va boshqalar) bilan bog'langan gidroksidi fosfataza maqsadli molekulalarni aniq aniqlashi mumkin va Elishay, WB va gistokimyoviy aniqlashda qo'llanilishi mumkin;
2. Ishqoriy fosfataza o'z-o'zini bog'lashni oldini olish uchun DNK yoki RNKning 5 '-terminalini fosforsizlantirish uchun ishlatilishi mumkin;
3. Yuqoridagi defosforillangan DNK yoki RNK radio-yorliqli fosfatlar (T4 poli-nukleotid kinaz orqali) bilan belgilanishi mumkin.
Kimyoviy tuzilishi
Spetsifikatsiya
| Sinov elementlari | Texnik xususiyatlari |
| Ferment faolligi | 5U/mkl |
| Endonukleaz faoliyati | Aniqlanmadi |
| Eksonukleaza faoliyati | Aniqlanmadi |
| Nicking faoliyati | Aniqlanmadi |
| RNaz faolligi | Aniqlanmadi |
| E.coli DNKsi | ≤1 nusxa/5U |
| Endotoksin | LAL-test, ≤10EU/mg |
| Tozalik | ≥95% |
Tashish va saqlash
Transport:Atrof muhit
Saqlash:2-8 ° C haroratda saqlang
Tavsiya etilgan qayta sinovHayot:2 yil
