BsaI cheklash endonukleazasi
Tavsif
BsaI cheklash fermenti E.coli tomonidan ifodalangan Bacillus sphaericusdagi BspQI geni tomonidan kodlangan rekombinant oqsildan olingan II turdagi cheklovchi endonukleazadir.Cheklovli endonukleazlar genlarni xaritalash, klonlash va boshqa sohalarda keng qo'llaniladi.Bu ferment DNKni samarali gen linearizatsiyasi uchun tezda kesadi Bsa I , IIs cheklash endonukleazasini cheklovchi endonukleaz, Bacillus stearothermophilusdan klonlangan va modifikatsiyalangan BsaI genini olib yuruvchi rekombinant E. coli shtammidan olingan.mahalliy fermentlar bilan bir xil o'ziga xos xususiyatlarga ega va yulduz faolligi kamayadi.Uning tanib olish ketma-ketligi va ajralish joylari quyidagicha:
5'·····GGTCTC(N)······ ··3'
3'·····CCAGAG(NNNNN)······5'
Kimyoviy tuzilishi
Mahsulot xususiyatlari
• Cheklovli endonukleaza yuqori fermentativ faollikka ega va ovqat hazm qilish reaksiyasini tez yakunlaydi.
• Aniq "skalpel" kesishni ta'minlash uchun o'ziga xos bo'lmagan endonukleaza faolligi past.
• BSA tizimi yo'q, issiqlik manbasining ifloslanishini kamaytiradi.
Spetsifikatsiya
Sinov elementlari | Texnik xususiyatlari |
Ferment faolligi | 20 U/mkl |
Soflik (SDS-PAGE) | ≥95% |
Rnase | Hech kim aniqlanmadi |
Nomaxsus DNaz faolligi | Aniqlanmagan |
Yulduzli faoliyat | Aniqlanmagan |
Ligatsiya va qayta kesish | Ovqat hazm qilingandan so'ng, DNK bo'laklarini bog'lash mumkin.Va bu bog'langan bo'laklar Bsal bilan qayta kesilishi mumkin. |
Endotoksinlar (LAL-test) | ≤10 EU/mg |
E.Coli DNKsi | ≤1 nusxa/2U |
Sifat nazorati
Sofligi ≥ 95%, DNase, RNase faolligi, Xost DNK qoldig‘i ≤ 100pg/mg, xost oqsili qoldig‘i ≤ -50ppm, endotoksin qoldig‘i ≤ 10EU/mg, Proteaz faolligi yo‘q, steril, mikoplazmasiz
Ilova
Poly (A/T/C/G) oxirida chiziqli DNK fragmentini tayyorlash uchun plazmidni hazm qiling;
In vitro transkripsiyasidan oldin plazmid shablonini linearizatsiya qilish;
Cheklov hazm qilish;
Birlik ta'rifi
Bir birlik umumiy reaksiya hajmi 50 µL bo‘lgan 37°C da 1 mkg ichki nazorat DNKsini 1 soatda hazm qilish uchun zarur bo‘lgan ferment miqdori sifatida aniqlanadi.
Tashish va saqlash
Transport:-15 ° C ostida jo'natiladi
Saqlash:-25~-15°C haroratda saqlang
Tavsiya etilgan qayta sinov muddati:1 yil