mag'rur
Mahsulotlar
BsaI HCP1014A Tavsiya etilgan rasm
  • BsaI HCP1014A

BsaI


Mushuk raqami: HCP1014A

Paket: 50mL/250mL/1mL/10mL/100mL

BsaI, IIs cheklash endonukleazasini cheklovchi endonukleaza birikmasi E. dan olingan.

Mahsulot tavsifi

Mahsulot ma'lumotlari

BsaI, IIs cheklash endonukleazasini cheklovchi endonukleaza, Bacillus stearothermophilusdan klonlangan va modifikatsiyalangan BsaI genini tashuvchi arekombinant E. coli shtammidan olingan. Ular mahalliy ferment bilan bir xil o'ziga xoslikka ega va yulduz faolligi pasaygan.Uning tanib olish ketma-ketligi va ajralish joylari quyidagicha:

5'·····GGTCTC(N)············3'

3'·····CCAGAG(NNNNN)···5'


  • Oldingi:
  • Keyingisi:

  • Komponentlar

    BsaI (20U/mkl), 10xBsaI bufer

     

    Saqlash

    -25 ℃ ~ -15 ℃ haroratda saqlang, 1 yil davomida amal qiladi (qayta-qayta muzlatish-eritish davrlaridan saqlaning).

     

    Saqlash buferi

    10 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM DTT 0,1 mM EDTA, 200 mkg/ml rekombinant albumin, 50% glitserin.(pH 7,4 @ 25°C).

     

    Mahsulot xususiyatlari

    Yuqori faollik, tez hazm qilish;

    1. Past yulduz faolligi, "skalpel" kabi aniq kesishni ta'minlash;

    2. BSA va hayvon kelib chiqishisiz.

    Metilatsiyaga sezgirlik

    Dam metilatsiyasi: sezgir emas;

    Dcm metilatsiyasi: Ba'zi bir-biriga o'xshash birikmalar tufayli buzilgan;

    CpG metilatsiyasi: Ba'zi bir-biriga o'xshash birikmalar bilan bloklangan.

     

     

    Birlik ta'rifi

    Bitta birlik 1 mkg ichki nazorat DNKsini 1 soat ichida 37°C da umumiy reaksiya hajmi 50 mkl hazm qilish uchun zarur bo‘lgan ferment miqdorini belgilaydi.

     

    Sifat nazorati

    Protein tozaligi tahlili (SDS-PAGE): Bsa I ning tozaligi Coomassie Blue aniqlash yordamida SDS-PAGE tahlili orqali ≥ 95% ni tashkil etdi.

    RNase:20 U Bsa I 1,6 mkg MS2 RNK bilan 16 soatlik 37 ℃ hosildor degradatsiyalar uchun agaroz gel elektroforezi bilan aniqlanadi.

    Nomaxsus DNaz faolligi:1 mkg PhiX174 DNK bilan 20 Uof BsaI 37 ℃ da 16 soat davomida agaroz gel elektroforezi bilan aniqlanganidek, ortiqcha DNK hosil qilmaydi.

    Ligatsiya va qayta kesish:1 mkg hazm qilinganidan keyin

    E.coli DNKsi:2Uof VacciniavirusCapping fermenti E. coli 16S rRNK lokusuga xos primerlar bilan TaqManqPCR yordamida E. coli genomik DNKsi mavjudligi uchun tekshiriladi.E. coli genomik DNK ifloslanishi ≤1 E. coli genomidir.

    Bakterial endotoksin:LAL-test, ChinesePharmacopoeiaIV2020 nashriga ko'ra, jel chegarasi sinov usuli, umumiy qoida (1143).Bakterial endotoksin miqdori ≤10 EU/mg bo'lishi kerak.

     

    Reaktsiya tizimi va shartlari

    Komponent

    Ovoz balandligi

    BsaI(20 U/mL)

    1 mkl

    DNK

    1 mkg

    10 x BsaI buferi

    5 mkl

    dd H2O

    50 mL gacha

    37 ° C da 15-30 daqiqa davomida inkubatsiya qiling.Issiqlik inaktivatsiyasi: 20 daqiqa davomida 80 ° C.

    Tavsiya etilgan reaktsiyalar tizimi va shartlari nisbatan yaxshi ferment hazm qilish effektini berishi mumkin, bu faqat ma'lumot uchun, iltimos, batafsil ma'lumot uchun tajriba natijalariga murojaat qiling.

     

    Ilovalar

    Cheklov fermenti hazm qilish Tez klonlash.

     

    Foydalanish bo'yicha eslatmalar

    1.Ferment hajmi reaksiya hajmining ≤ 1/10 qismi.

    2. Glitserin kontsentratsiyasi 5% dan ortiq bo'lsa, staraktivlik paydo bo'lishi mumkin.

    3. Substrat tavsiya etilgan nisbatdan past bo'lsa, parchalanish faolligi paydo bo'lishi mumkin.

     

    Xabaringizni shu yerga yozing va bizga yuboring