Bst 2.0 DNK polimeraza (glitserinsiz, yuqori zichlikli)
Bst DNK polimeraza V2 Bacillus stearothermophilus DNK polimeraza I dan olingan bo'lib, u 5'→3' DNK polimeraza faolligi va kuchli zanjir almashtirish faolligiga ega, ammo 5'→3' ekzonukleaza faolligi yo'q.Bst DNK Polimeraza V2 ipni siljitish, izotermik kuchaytirish LAMP (Loop mediated isothermal amplification) va tez ketma-ketlik uchun juda mos keladi.Ushbu Bst DNK polimeraza V2 xona haroratida DNK polimeraza faolligini inhibe qilishga qodir, shuning uchun uni ishlatish va reaktsiya tizimini xona haroratida shakllantirish, o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirishni oldini olish va reaktsiya samaradorligini oshirish mumkin. liyofilizatsiya qilinadi.Bundan tashqari, u o'z faolligini yuqori haroratlarda chiqarishga qodir, shuning uchun alohida faollashtirish bosqichiga ehtiyoj yo'q.
Komponentlar
| Komponent | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNK polimeraza V2 (glitserinsiz) (32U/mkl) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 bufer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Ilovalar
1.LAMP izotermik kuchaytirish
2.DNK zanjirining bitta joy almashish reaktsiyasi
3.Yuqori GC gen sekvensiyasi
4.Nanogramma darajasidagi DNK ketma-ketligi.
Saqlash holati
0 ° C ostida tashish va -25 ° C ~ -15 ° C haroratda saqlanadi.
Birlik ta'rifi
Bitta birlik 65°C da 30 daqiqada kislotada erimaydigan moddaga 25 nmol dNTP ni birlashtirgan ferment miqdori sifatida aniqlanadi.
LAMP reaktsiyasi
| Komponentlar | 25 mLTizim |
| 10×HC Bst V2 bufer | 2,5 mkl |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 mkl |
| dNTPs (har biri 10 mM) | 3,5 mkl |
| SYTO™ 16 Yashil (25×)a | 1,0 mkl |
| Primer aralashmasib | 6 mkl |
| Bst DNK polimeraza V2 (glitserinsiz) (32 U/uL) | 0,25 mkl |
| Shablon | × mL |
| ddH₂O | 25 mL gacha |
Eslatmalar:
1) a.SYTOTM 16 Yashil (25 ×): Eksperimental ehtiyojlarga ko'ra, boshqa bo'yoqlardan o'rinbosar sifatida foydalanish mumkin;
2) b.Primer aralashmasi: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB va boshqa hajmlarni aralashtirish orqali olinadi.
Reaktsiya va holat
1 × HC Bst V2 Bufer, inkubatsiya harorati 60°C va 65°C orasida.
Issiqlik inaktivatsiyasi
80 ° C, 20 daqiqa.
