DNase I (Rnase Free) (5u/ul)
Mushuk raqami: HC4007A
DNaz I (Deoksiribonukleaza I) bir yoki ikki zanjirli DNKni hazm qila oladigan endodeoksiribonukleazadir.U 5'-terminalda fosfat guruhlari va 3'-terminalda gidroksil bo'lgan monodeoksinukleotidlar yoki bir yoki ikki zanjirli oligodeoksinukleotidlarni hosil qilish uchun fosfodiester bog'lanishlarini taniydi va ajratadi.DNaz I ning faolligi Ca ga bog'liq2+va Mn kabi ikki valentli metall ionlari bilan faollashishi mumkin2+va Zn2+.5 mM Ca2+fermentni gidrolizdan himoya qiladi.Mg ishtirokida2+, ferment tasodifiy ravishda DNKning istalgan zanjiridagi istalgan joyni tanib, parchalashi mumkin edi.Mn ishtirokida2+, DNKning qo'sh iplari bir vaqtning o'zida tan olinishi va deyarli bir joyda bo'linishi mumkin, bu tekis uchli DNK bo'laklarini yoki 1-2 nukleotidlari chiqadigan yopishqoq uchli DNK bo'laklarini hosil qiladi.
Komponentlar
| Ism | 0,1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| DNaz I, RNazsiz | 20 mkl | 200 mkl | 1 ml | 10 ml |
| 10 × DNase I buferi | 1 ml | 1 ml | 5 × 1 ml | 5 × 10 ml |
Saqlash shartlari
Saqlash uchun -25 ℃ ~ -15 ℃;Muz paketlari ostida tashish.
Ko'rsatmalar
1. Reaksiya eritmasini RNazsiz trubkada quyida keltirilgan nisbatlarga muvofiq tayyorlang:
| Komponent | Ovoz balandligi |
| RNK | X mkg |
| 10 × DNase I buferi | 1 mkl |
| DNase I, RNazsiz (5U/mkl) | mkg RNK uchun 1 U① |
| ddH2O | 10 mkl gacha |
Eslatma: ①RNK miqdori asosida qo'shilishi kerak bo'lgan DNase I hajmini hisoblang.
2. 37 ℃ 15 daqiqa davomida;
3. 2,5 mM ~ 5 mM yakuniy konsentratsiyasiga 0,5 M EDTA qo'shing va reaktsiyani to'xtatish uchun 65 ℃ da 10 daqiqa davomida qizdiring.Namuna to'g'ridan-to'g'ri teskari transkripsiya kabi keyingi reaktsiya uchun ishlatilishi mumkintajriba.
Birlik ta'rifi
Bitta birlik 1 mkg pBR322 ni butunlay parchalaydigan ferment miqdori sifatida aniqlanadi37℃ da 10 daqiqada DNK.
Sifat nazorati
RNase:37 ℃ haroratda 4 soat davomida 1,6 mkg MS2 RNK bilan 5U DNase I hech qanday degradatsiyaga olib kelmaydi.agaroz gel elektroforezi bilan aniqlanadi.
Eslatmalar
1. Iltimos, o'zingiz 0,5 MEDTA tayyorlang.
2. RNKning mkg uchun 1U DNase I dan foydalaning.Biroq, agar RNK 1 mkg dan kam bo'lsa, iltimos, 1U DNase I dan foydalaning.
3. Iltimos, operatsiya vaqtida fermentni muz ustiga qo'ying.
