2×HiF Taq plus Master Mix
Mushuk raqami: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (bo'yoq bilan) bu foydalanishga tayyor, Plus HIF DNK polimeraza, dNTP va optimallashtirilgan buferni o'z ichiga olgan 2 × oldindan aralashtirilgan eritma.Xona haroratida polimeraza faolligini va 3'→5'eksonukleaza faolligini inhibe qiluvchi ikkita monoklonal antikor oson va yuqori o'ziga xos Hot Start PCR uchun asosiy aralashmaga qo'shiladi.Fermentga uzun fragmentni kuchaytirish qobiliyatini berish uchun kengaytma omili asosiy aralashmaga qo'shiladi, kuchaytirilish uzunligi 13 kb gacha bo'lishi mumkin, ferment 5'→3' DNK polimeraza faolligiga va 3'→5'ga ega. ekzonukleaza faolligi, uning ishonchliligi Taq DNK polimerazasidan 83 baravar, bu oddiy DNK polimerazasidan 9 baravar yuqori.Bu murakkab shablonlarni kuchaytirish uchun javob beradi, kuchaytirish mahsuloti to'mtoq uchidir.
2 × HIF Taq plus Master Mix (bo'yoq bilan) tez va oson, yuqori sezuvchanlik, kuchli o'ziga xoslik, yaxshi barqarorlik va boshqalarning afzalliklariga ega, reaktsiya tizimi faqat primerlar va shablonlarni qo'shishi kerak va ularni ikki marta kuchaytirilishi mumkin. qadam protokoli, eksperimental bosqichlarni soddalashtirish va vaqtni tejash.Ushbu mahsulot elektroforez indikator bo'yoqlarini o'z ichiga oladi va PCR mahsulotlari to'g'ridan-to'g'ri elektroforez uchun ishlatilishi mumkin.Bundan tashqari, mahsulot o'ziga xos himoya vositasini ham o'z ichiga oladi, shuning uchun asosiy aralash takroriy muzlatish-eritishdan keyin barqaror faollikni saqlab turishi mumkin.
Saqlash shartlari
Mahsulotlar 1 yil davomida -25 ~ -15 ℃ haroratda saqlanishi kerak.
Texnik xususiyatlari
| Mahsulot spetsifikatsiyasi | Master Mix |
| Diqqat | 2× |
| Issiq boshlanish | O'rnatilgan Hot Start |
| Osilgan | To'mtoq |
| Reaktsiya tezligi | Tez |
| Hajmi (yakuniy mahsulot) | 13 kb gacha |
| Tashish uchun shartlar | Quruq muz |
| Mahsulot turi | Yuqori aniqlikdagi PCR premikslari |
Ko'rsatmalar
1.PCR reaktsiya tizimi
| Komponentlar | Hajmi (mL) |
| DNK shablon | Mos |
| Oldinga primer (10 mkmol/L) | 2.5 |
| Teskari astar (10 mkmol/l) | 2.5 |
| 2×HIF Taq plus Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50 ga |
2.Turli xil shablonlardan foydalanish tavsiya etiladi
| Shablon turi | Fragmanlarni 1 kb dan 10 kb gacha kuchaytiring |
| Genomik DNK | 50-200 ng |
| Plazmid yoki Virusli DNK | 10pg-20ng |
| cDNK | 1-2,5 µL (Yakuniy PCR reaktsiyasi hajmining 10% dan oshmasligi kerak) |
3.Amplifikatsiya protokoli
1) Ikki bosqichli protokol (murakkablik shabloni)
| Velosiped bosqichi | Temp. | Vaqt | Velosipedlar |
| Dastlabki denaturatsiya | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturatsiya | 98℃ | 10 soniya | 30-35 |
| Kengaytma | 68℃ | 30 sek/kb | |
| Yakuniy kengaytma | 72℃ | 5 min | 1 |
2) Uch bosqichli protokol (odatiy protokol)
| Velosiped bosqichi | Temp. | Vaqt | Velosipedlar |
| Dastlabki denaturatsiya | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturatsiya | 98℃ | 10 soniya | 30-35 |
| Yuvish | 60℃ | 20 sek | |
| Kengaytma | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Yakuniy kengaytma | 72℃ | 5 min | 1 |
3) Gradientni yumshatish protokoli (murakkablik shabloni)
| Velosiped bosqichi | Harorat | Vaqt | Velosipedlar |
| Dastlabki denaturatsiya | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturatsiya | 98℃ | 10 sek | 15 (Har bir tsikl uchun 1 ℃ pasayish) |
| Gradientni yumshatish | 70-55 ℃ | 20 sek | |
| Kengaytma | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Denaturatsiya | 98℃ | 10 sek |
20 |
| Yuvish | 55℃ | 20 sek | |
| Kengaytma | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Yakuniy kengaytma | 72℃ | 5 min | 1 |
Turli xil kuchaytirish protokoli ostidagi xususiyatlar
| Protokol | Ikki bosqichli | Uch bosqichli | Gradientni yumshatish |
| Spesifik. | tez | o'rta | sekin |
| O'ziga xoslik | yuqori | o'rta | yuqori |
| PCR rentabelligi | o'rta | yuqori | o'rta |
| Aniqlanish darajasi | yuqori | o'rta | yuqori |
Eslatmalar
Iltimos, sog'ligingiz va xavfsizligingizni ta'minlash uchun kerakli shaxsiy himoya vositalarini, shu kabi laboratoriya xalati va qo'lqoplarni kiying!
