One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Mushuk raqami: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) - bu zondga asoslangan RT-qPCR tez aniqlash to'plami bo'lib, RNKni shablon sifatida ishlatib, bir-pleks yoki multipleks miqdoriy PCR uchun mos keladi (masalan, RNK virusi).Ushbu mahsulot antikor bilan o'zgartirilgan Taq DNK polimerazasining yangi avlodi va bir bosqichli maxsus teskari transkriptazadan foydalanadi, tez kuchaytirish uchun optimallashtirilgan buferga ega, bu tezroq kuchaytirish tezligi, yuqori kuchaytirish samaradorligi va o'ziga xosligiga ega.U qisqa vaqt ichida past va yuqori konsentratsiyali namunalarning bir-pleks va multiplekslarida muvozanatli kuchaytirishni qo'llab-quvvatlaydi.
Komponentlar
1. 5×RT-qPCR buferi (U+)
2. Fermentlar aralashmasi (U+)
Eslatmalar:
a.5×RT-qPCR buferi (U+) dNTP va Mg ni o'z ichiga oladi2+;
b.Ferment aralashmasi (U+) teskari transkriptaza, Hot Start Taq DNK polimeraza, RNase inhibitori va UDGni o'z ichiga oladi;
c.RNase-Free maslahatlari, EP naychalari va boshqalardan foydalaning.
Ishlatishdan oldin 5×RT-qPCR buferini (U+) yaxshilab aralashtiring.Eritgandan keyin yog'ingarchilik bo'lsa, buferning xona haroratiga qaytishini kuting, aralashtiring va eritib oling va keyin ularni odatdagidek ishlating.
Saqlash shartlari
Mahsulot quruq muz bilan jo'natiladi va 1 yil davomida -25 ~ -15 ℃ da saqlanishi mumkin.
Ko'rsatmalar
1. Reaksiya Tizim
Komponentlar | Hajmi (20 mkl reaktsiya) |
2 ×RT-qPCR buferi | 4 mkl |
Ferment aralashmasi (U+) | 0,8 mkl |
Primer oldinga | 0,1 ~ 1,0 mkM |
Primer teskari | 0,1 ~ 1,0 mkM |
TaqMan probe | 0,05 ~ 0,25 mkM |
Shablon | X mL |
RNazsiz suv | 25 mkl gacha |
Eslatmalar: Reaktsiya hajmi 10-50 mkl.
2. Velosiped protokoli (Sstandart)
Velosiped qadam | Temp. | Vaqt | Velosipedlar |
Teskari transkripsiya | 55 ℃ | 10 min | 1 |
Dastlabki denaturatsiya | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
Denaturatsiya | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
Yuvish/kengaytirish | 60 ℃ | 30 sek |
Velosiped protokoli (Tez) Velosiped qadam |
Temp. |
Vaqt |
Velosipedlar |
Teskari transkripsiya | 55 ℃ | 5 min | 1 |
Dastlabki denaturatsiya | 95 ℃ | 5 s | 1 |
Denaturatsiya | 95 ℃ | 3 s | 43 |
Yuvish/kengaytirish | 60 ℃ | 10 s |
Eslatmalar:
a.Teskari transkripsiya harorati 50 ℃ dan 60 ℃ gacha, haroratni oshirish murakkab tuzilmalarni va yuqori CG tarkibi shablonlarini kuchaytirishga yordam beradi;
b.Optimal yumshatish harorati primerning Tm qiymatiga qarab sozlanishi va Real Time PCR asbobi asosida floresans signalini yig'ish uchun eng qisqa vaqtni tanlash kerak.
Eslatmalar
Iltimos, sog'ligingiz va xavfsizligingizni ta'minlash uchun kerakli shaxsiy himoya vositalarini, masalan, laboratoriya xalati va qo'lqoplarni kiying!