Ultra Nuclease GMP darajasi
Mushuk raqami: HC2016A
UltraNuclease GMP darajasi genetik jihatdan ishlab chiqilgan va GMP muhitida tayyorlangan Escherichia coli (E.coli) da ifodalanadi va tozalanadi.Ilmiy tadqiqotlarda hujayra supernatanti va hujayra lizatining viskozitesini kamaytirishi, oqsillarni tozalash samaradorligini oshirishi va oqsil funktsional tadqiqotlarini kuchaytirishi mumkin.Mahsulot shuningdek, mezbon nuklein kislotasi qoldiqlarini pg darajasiga kamaytirishi mumkin, biologik mahsulotlarning ishlashi va xavfsizligini yaxshilaydi, shu jumladan viruslarni tozalash, vaktsina ishlab chiqarish va oqsil/polisakkarid farmatsevtika ishlab chiqarish.Bundan tashqari, mahsulot hujayra terapiyasi va vaktsinani ishlab chiqishda inson periferik qonining mononuklear hujayralari (PBMC) to'planishining oldini olish uchun ham qo'llanilishi mumkin.
UltraNuclease buferda (20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glitserin) elutsiya qilingan sterillangan reagent shaklida, rangsiz, shaffof suyuqlik ko'rinishida taqdim etiladi.Ushbu mahsulot GMP jarayoni talablariga muvofiq ishlab chiqariladi va suyuqlik shaklida taqdim etiladi.
Komponentlar
UltraNuclease GMP darajasi (250 U/mkl)
Saqlash shartlari
Mahsulot quruq muz bilan jo'natiladi va ikki yil davomida -25 ℃ ~ -15 ° C da saqlanishi mumkin.
Agar mahsulot ochilsa va 4℃ haroratda bir haftadan ko'proq vaqt davomida saqlangan bo'lsa, filtrlashni tavsiya etamizmahsulot mikroblarning ifloslanishini oldini olish uchun.
Texnik xususiyatlari
| Expression Host | UltraNuclease geni bilan rekombinant E. coli |
| Molekulyar og'irlik | 26,5 kDa |
| soelektrik nuqta | 6.85 |
| Tozalik | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Saqlash buferi | 20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glitserin |
|
Birlik ta'rifi | Bitta Faoliyat birligining ta'rifi (U) - ishlatiladigan ferment miqdoriDA260 ning yutilish qiymatini 2,625 ml ichida 30 daqiqada 1,0 ga o'zgartiringreaktsiya tizimi 37 ℃ da pH 8,0 (to'liq hazm bo'lishiga teng)37 mkg qizil ikra sperma DNKsi oligonükleotidlarga). |
Ko'rsatmalar
1. Namuna To'plam
Yopishqoq hujayralar: muhitni olib tashlang, hujayralarni PBS bilan yuving va supernatantni olib tashlang.
Suspension hujayralar: hujayralarni sentrifugalash orqali yig'ing, hujayralarni PBS bilan yuving, 6000 da santrifüj qiling.10 daqiqa davomida rpm, granulani yig'ing.
Escherichia coli: bakteriyalarni santrifugalash orqali to'plang, PBS bilan bir marta yuving, 8000 da santrifüj qiling.5 daqiqa davomida rpm va granulani yig'ing.
2. Namuna bilan ishlov berish
Yig'ilgan hujayra pelletlarini massa (g) hajmi (ml) 1: (10-20) nisbatida lizis buferi bilan yoki mexanik yoki kimyoviy usullar bilan muzda yoki xona haroratida (1 g hujayra pelletida taxminan 1 g ni tashkil qiladi) ishlang.
109 hujayra).
3. Fermentlar bilan davolash
Reaksiya tizimiga 1-5 mM MgCl qo'shing va pH ni 8-9 ga sozlang.
1 g hujayra granulalarini hazm qilish uchun 250 birlik nisbatiga ko'ra UltraNuclease qo'shing, 37 ℃ da 30 daqiqadan ko'proq vaqt davomida inkubatsiya qiling.Tanlash uchun “Tavsiya etilgan reaksiya vaqti” shakliga qarangdavolash davomiyligi.
4. Supernatant To'plam
30 daqiqa davomida 12000 aylanish tezligida santrifüj qiling va supernatantni to'plang.
Eslatma: Agar eritma kislotali yoki ishqoriy bo'lsa yoki yuqori konsentratsiyada tuz, yuvish vositalari yokidenaturantlar uchun ferment dozasini oshiring yoki shunga mos ravishda davolash vaqtini uzaytiring.
Tavsiya etilgan reaksiya shartlarions
| Parametr | Optimal holat | Samarali konditsioner |
| Mg²+Konsentratsiya | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Harorat | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT konsentratsiyasi | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanol kontsentratsiyasi | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent kation kontsentratsiyasi | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat lon kontsentratsiyasi | 0-10 mM | 0-100 mM |
Tavsiya etilgan Reaktsiya Vaqt (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Ultranukleaz miqdori (yakuniy kontsentratsiya) | Reaktsiya vaqti |
| 0,25 U/ml | >10 soat |
| 2,5 U/ml | >4 soat |
| 25 U/ml | 30 min |
Eslatmalar:
Iltimos, sog'ligingiz va xavfsizligingizni ta'minlash uchun kerakli shaxsiy himoya vositalarini, masalan, laboratoriya xalati va qo'lqoplarni kiying!
